Sự gia tăng số lượng nhân vật có giới tính mơ hồ khiến người yêu thích anime trở nên hứng thú hơn bao giờ hết.
Một khái niệm phổ biến trong anime là nhân vật lưỡng tính, cho rằng vẻ đẹp của phụ nữ là tiêu chuẩn của cái đẹp. Điều này đã xuất hiện trong nhiều anime/manga nổi tiếng, khi nhân vật có vẻ ngoài như cô gái xinh đẹp nhưng thực chất là nam giới.
Tùy theo từng tác phẩm mà nhân vật có giới tính mơ hồ xuất hiện với mục đích khác nhau. Những nhân vật không xác định giới tính thường mang lại tình huống hài hước, hoặc nếu tác phẩm tập trung vào kịch tính thì mục đích cũng có thể thay đổi. Ngoài ra, những nhân vật Hideyoshi thường bị người khác nhầm lẫn với nữ giới dù thực chất họ là nam.
Một ví dụ tiêu biểu là nhân vật Najimi Osana trong tác phẩm 'Komi-san wa, Komyushou Desu' (Komi không thể giao tiếp). Đây là một nhân vật lưỡng tính điển hình khi đến nay, chưa ai rõ giới tính thật của Najimi. Câu hỏi nổi tiếng từ anime này là 'Najimi là gì?' với câu trả lời: 'Najimi là Najimi'.
Một số ví dụ cổ điển hơn là nhân vật Ruka trong STEINS;GATE, khi cô nói với Kurisu: 'Thật thiếu tôn trọng khi gọi một cô gái là con trai'. Tuy nhiên, Ruka cũng thừa nhận mình là nam khi ngủ, khiến Kurisu ngạc nhiên.
Điều thú vị là khi có càng nhiều nhân vật lưỡng tính xuất hiện trong anime/manga, cộng đồng mạng càng cảm thấy hứng thú hơn bao giờ hết. Mặc dù đây là mô-típ không mới, nó vẫn mang đến sự ngạc nhiên, hài hước và đôi khi là bối rối cho người xem khi các nhân vật này xuất hiện.